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大豆肽制备工艺

   日期:2023-08-25 00:10:42     来源:网络整理    作者:本站编辑    浏览:50    评论:0    

1、豆类中氨基酸组成

      豆类蛋白中必需氨基酸含量丰富,含量较高的必需氨基酸是Leu与Lys,其中鹰嘴豆蛋白中必需氨基酸占总氨基酸含量百分比(EAA/TAA)最高为36.17%,豌豆蛋白EAA/TAA最低为30.37%有,其余豆类蛋白中EAA/TAA由高到低依次为:刀豆蛋白、豇豆蛋白、红豆蛋白、绿豆蛋白、芸豆蛋白、扁豆蛋白、大豆蛋白、黑豆蛋白。

     不同氨基酸具有不同的滋味。

2、不同豆类蛋白分子量

      不同品种的豆类蛋白组成质检有明显差异。

豆类品种
分子量/kDa
黑豆蛋白

 20 kDa~97 kDa

7Sβ-伴大豆球蛋白:α‘-71,α-67,β-50,疏水作用组成

11S大豆球蛋白:酸性多肽链A-38,碱性多肽链B-20,二硫键连接

大豆蛋白

180 kDa~210 kDa,7Sβ-伴大豆球蛋白:α‘-71,α-67,β-50,疏水作用组成

360 kDa,11S大豆球蛋白:酸性多肽链A-38,碱性多肽链B-20,二硫键连接

豌豆蛋白

75kDa

11S(300 kDa~400 kDa)、7S 球蛋白(150 kDa~180 kDa)

以及清蛋白(5 kDa~80 kDa)

鹰嘴豆蛋白

17~95kDa

球蛋白(56%)、谷蛋白(18%)、清蛋白(12%)和

醇溶蛋白(2.8%)组成

绿豆蛋白
55~72
红豆蛋白
55~72
豇豆蛋白
55~72
芸豆蛋白
32~55
刀豆蛋白
17~130
扁豆蛋白

17~130kDa

球蛋白(70%,包括 7S 和 11S 球蛋白)和清蛋白(30%),且不含有 N-糖基化修饰蛋白 。扁豆蛋白中疏水性氨基酸含量丰富(35%),带正电荷氨基酸(精氨酸、赖氨酸)含量(16%)显著高于其他豆类蛋白。

       大豆蛋白由球蛋白(90%)和清蛋白(5%)组成,其中,球蛋白包括 β-伴大豆球蛋白(7S)和大豆球蛋白(11S)。7S 球蛋白相对分子量为 180 kDa~210 kDa,含有少量硫键和巯基;而 11S 球蛋白的相对分子量约为360 kDa,含有较多二硫键,且含有巯基 虽然大豆是常见的食物过敏原之一,但豆粕经酶解或发酵后致敏性降低,得到分子量<10 kDa 的肽类混合物,其中,分子量<3 kDa 的组分不会引起过敏反应

3、豆类蛋白酶解工艺

3.1 酶解前处理

      蛋白质是由氨基酸通过肽键相连而成的长链聚物,通过范德华力、氢键、二硫键、疏水作用力、静电作用力等方式形成复杂的空间构象,因此,大部分非极性侧链隐藏于分子内部。在水解前,豆类蛋白或豆粕等原料需预处理,破坏二级和三级等空间结构,暴露非极性基团,便于蛋白酶水解。目前,预处理方法主要包括加热、超声波、微波及高压均质等,暴露豆类蛋白的酶切位点,提高酶解效率,促进蛋白质原料的充分利用

3.2 酶制剂种类

蛋白酶种类蛋白酶来源 
最适pH
最适温度/℃
酶切位点
胃蛋白酶
动物
2.0~3.0
37
亮氨酸,苯丙氨酸
胰蛋白酶
动物
7.5~8.5
37
精氨酸,赖氨酸
胰凝乳蛋白酶
动物
7.0
37
色氨酸,酪氨酸
菠萝蛋白酶
植物
6.0~7.5
55~62
赖氨酸,丙氨酸,酪氨酸,甘氨酸
木瓜蛋白酶
植物
7.0~8.5
65~70
精氨酸,赖氨酸,苯丙氨酸

碱性蛋白酶

内切

微生物
9.5~12.0
50~57
丙氨酸,亮氨酸,缬氨酸,酪氨酸,苯丙氨酸

中性蛋白酶

内切

微生物
6.8~7.5
45~50
亮氨酸,苯丙氨酸

风味蛋白酶

内切+外切

微生物
5.0~6.9
41~52
疏水性氨基酸

注:疏水性氨基酸包括酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丙氨酸和蛋氨酸(甲硫氨酸)。

 6 种单一蛋白酶水解生成的蛋白和肽分子量范围差异很大, 大豆蛋白改性酶水解效果最好, 酶解后分子量分布范围在 6 441~ 144 Dalton 之间, MW ≤1 000 Dalton 的组分占 97.42%, 符合肽的标准.6 种复合蛋白酶水解生成的蛋白和肽分子量范围差异也很大, 以大豆蛋白改性酶与蛋白液化剂组合最好, 其分子量范围在 4 560~ 141 Dalton 之间, MW ≤1 000 Dalton 的组分占 99.52%.

3.3 大豆肽分子量分布状态分析依据

       依据 QB/ T 22492-2008 规定分子量≤5 000 Dalton 为大豆肽 ;一级品 MW ≤2 000 Dalton, 二级品 MW≤5 000 Dalton, 肽含量 ≥80%.据资料报导生物活性肽是一类分子量小于 6 000 Dalton, 具有多种生物学功能的多肽;具有活性的大豆肽是多肽混合物, 以 3 ~ 6 个氨基酸组成的小分子肽为主, 分子质量在 1 000Dalton 以下。

 
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