武汉研锦生物（YanGeneBio）是一家专注于药物靶点发现与药物机制验证的创新型生物技术服务公司，为新药研发、中药现代化及天然产物研究提供从靶点发现到机制验证的一站式解决方案。
我们整合ABPP、TPP、Lip-MS等药物钓靶技术，交联质谱、Lip-MS+分子对接鉴定药靶互作位点技术，SPR/MST/BLI/ITC/DSF检测药靶亲和力平台，蛋白芯片、Olink 多因子等高通量筛选检测平台，小核酸药物合成与类器官筛药等核心技术，为客户提供高精度的化合物靶点鉴定、结合位点分析、亲和力验证及功能验证服务。
研锦生物以 “精准靶点、加速创新” 为使命，凭借严格的实验设计、高质量的数据输出和快速的项目交付，助力全球科研与药企客户缩短研发周期、提升药物发现成功率。
一.
技术原理
小干扰RNA（siRNA）是长度约21–23 bp的双链RNA分子，通过RNA干扰（RNAi）通路实现序列特异性基因沉默。siRNA进入细胞后，被Dicer酶识别并加工，随后组装形成RNA诱导沉默复合体（RISC）；其中一条链作为向导链靶向结合互补mRNA，诱导Argonaute（AGO）蛋白催化切割靶mRNA，使其快速降解，从而在转录后水平抑制目的基因表达。
为克服天然siRNA易被核酸酶降解、脱靶效应明显、细胞摄取效率低等问题，现代siRNA研发普遍采用化学修饰与结构优化策略，包括硫代磷酸酯骨架（PS）、2’-O-Me、2’-F、LNA等修饰，在不显著影响沉默效率的前提下，大幅提升稳定性、特异性与体内适用性。
二.
标准实验流程
1.序列设计与筛选
遵循GC含量40%–60%、避开二级结构、BLAST比对降低同源性等原则，设计3–5条候选siRNA序列，优先选择靶向mRNA编码区的高效沉默位点。
2.化学合成与修饰
采用固相亚磷酰胺法合成正义链与反义链，引入2’-F、2’-O-Me等化学修饰，合成后进行退火、HPLC纯化与脱盐处理。
3.质控与定量
通过琼脂糖凝胶电泳、LC-MS、紫外分光光度法进行分子量、纯度与浓度鉴定，确保终产品纯度≥97%。
4.细胞水平功能验证
细胞培养、siRNA转染、qPCR检测mRNA水平、Western Blot检测蛋白表达水平，同时设置阴性对照、阳性对照与空白对照组。
5.数据分析与评价
计算基因沉默效率、IC50、相对表达量，综合评估稳定性、沉默活性与细胞毒性。
三.
结果与数据分析
以靶向管家基因GAPDH与疾病相关基因的siRNA为研究对象，获得典型实验数据：
•纯化后siRNA纯度≥97.5%，分子量与理论值偏差＜1 Da；
•化学修饰siRNA在10%血清中孵育48 h仍保持完整条带，未修饰siRNA在6 h内基本降解；
•转染24–48 h后，qPCR显示mRNA敲低效率达75%–90%，Western Blot对应蛋白水平下降70%–85%；
•优化修饰序列脱靶率显著降低，非特异性基因表达扰动＜1%，细胞存活率＞90%。
对比结果表明：化学修饰siRNA在稳定性、沉默效率、特异性与生物安全性上均显著优于未修饰siRNA，可满足体外细胞实验与体内初步研究需求。
四.
核心优势
6.沉默效率高
纳摩尔级浓度即可实现高效基因敲低，操作简便、起效快。
7.特异性强
严格依赖碱基互补配对，理论上可靶向任意基因，适用于功能基因组学研究。
8.适用性广
支持绝大多数哺乳动物细胞系，兼容qPCR、Western Blot、免疫荧光、双荧光素酶等多种检测手段。
9.可工程化优化
通过化学修饰提升稳定性、降低免疫原性、减少脱靶效应，适配细胞水平与动物水平研究。
五.
应用案例
10.肿瘤靶点验证研究
研究人员利用化学修饰siRNA沉默肿瘤关键驱动基因，在肺癌、肝癌细胞系中实现80%以上基因敲低，显著抑制细胞增殖、迁移与克隆形成，为新靶点确证提供直接证据。
11.神经调控与信号通路研究
siRNA被广泛用于阻断关键信号分子（如AKT、MAPK、Notch等），通过观察表型变化与下游分子表达，完整解析信号传导机制，多篇研究发表于领域内高水平期刊。
12.抗病毒与感染研究
针对病毒保守序列设计siRNA，可有效抑制病毒复制与蛋白表达，为抗病毒机制研究与候选药物开发提供快速筛选工具。
六.
服务覆盖实验
•siRNA序列设计、化学合成与退火
•2’-F、2’-O-Me、硫代骨架等定制修饰
•荧光标记（FAM、Cy3/Cy5）与偶联物合成
•纯度分析、分子量鉴定、浓度定量
•细胞转染、qPCR、Western Blot功能验证
•高通量siRNA文库合成与基因筛选服务
七.
总结
siRNA作为RNA干扰技术的核心工具，凭借高效、特异、便捷的基因沉默能力，已成为基因功能研究、信号通路解析、药物靶点验证与疾病机制探索的关键技术。通过高质量合成+理性化学修饰，可显著提升siRNA稳定性、沉默效率与安全性，满足从基础科研到临床前研究的多元需求。
完善的siRNA合成、修饰、质控与功能验证体系，为生命科学研究与创新药物研发提供标准化、高可靠性解决方案，助力高质量科研成果快速产出。
Yangenebio对于中药及小分子药物研究，建立了一套完整的技术服务体系：
武汉研锦生物科技有限公司（YanGeneBio）提供产品：
1,天然产物、中药、代谢物等化合物靶点发现及SPR亲和力验证解决方案：
1）中药／复方的有效成分高精度鉴定，网络药理学分析及SPR验证互作；
2）化合物钓靶（标记法）:ABPP钓靶（特异性强，重复性高，细胞水平钓靶）；
3）化合物钓靶（非标记法）:Lip-MS/CETSA（细胞、组织裂解液水平钓靶）；
4)生物素标记法Spider药物钓靶(细胞、组织裂解液水平钓靶)5)SPR/MST/BLI/ITC/DSF等策略检测分子间亲和力；
6）药﹣靶结合位点分析（Lip-MS+分子对接鉴定纯蛋白与化合物互作位点）；
7）蛋白-蛋白结合位点分析（交联质谱+分子对接鉴定2个纯蛋白间互作位点）；
8）ABPP-WB/CETSA-WB 在细胞水平鉴定药物与靶点蛋白互作分析；
9）提供真核、原核蛋白表达纯化服务；
10）提供定制化基因敲除细胞模型验证药物活性；
11）基于分子对接等策略提供化合物高通量虚拟筛选技术服务；
12）提供蛋白、抗体芯片筛选服务：磷酸化抗体芯片，炎症因子蛋白芯片等检测服务；
13）提供Olink多因子蛋白组学检测服务。
14）ASO等核酸修饰合成，siRNA核酸合成，类器官筛药服务。
2,提供重组活性细胞因子产品：应用类器官培养、完全培养基添加剂、干细胞培养、细胞治疗等领域。
3,提供分子互作仪、细胞电转仪、蛋白纯化仪、核酸合成仪及纯化仪等设备。
