当吸收光谱相互重叠的两种组分共存时,利用双波长可对单个组分进行测定或同时对两个组分进行测定。
如下图所示,当a、b两组分共存时,如要测定组分b的含量,组分a的干扰可通过选择具有对a组分等吸收的两个波长
和
加以消除。

以
为参比波长,
为测定波长,对混合液进行测定,可得到如下方程式
和
是在波长
和
下的背景吸收。当两个波长相距较近时,可认为背景吸收相等,因此通过试样吸收池的两个波长的光的吸光度差值为
和
处具有等吸收,即
,因此上式为
)为一定值,吸收池厚度
也是固定的,所以
与组分b的浓度
呈正比。
当干扰组分的吸收曲线在测量的波长范围内无吸收峰时,等吸收点法就无法应用,这时可采用系数倍率法进行测定,并采用具有双波长功能的分光光度计来完成。
假设被测组分为
。干扰组分为
,选择两个波长
和
,使
和
的两束光分别通过吸收池,得到两个吸光度值A1和A2,然后由函数放大器分别放在
和
倍,由此得到差示信号

和
分别是两组分混合物在波长
和
处的吸光度,即

和
,使之满足
在
和
处显示等同信号,即
,在此条件下
就只与被测组分x的浓度
有关,因而有可能测定出混合物中组分x的含量。

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