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梯度PCR仪

   日期:2025-11-11 00:22:33     来源:网络整理    作者:本站编辑    评论:0    
梯度PCR仪

梯度PCR仪

品牌与型号:Thermo Fisher Scientific / VERITI 96-well

核心应用:PCR条件优化;快速PCR;标准PCR

1. 核心功能与优势。

普通PCR仪的局限:在进行PCR实验时,一个关键参数是退火温度。如果使用的引物退火温度不理想,可能导致扩增效率低、产物特异性差甚至失败。

梯度PCR仪的原理:它可以在一次运行中,在PCR仪的不同加热模块上产生一个精确的温度梯度。例如,您可以将96孔板设置成一个从55°C到65°C的线性温度梯度。这样,同一对引物就可以在12个不同的退火温度下同时进行测试。

核心优势:

高效快速:将原本需要数天完成的退火温度优化实验,缩短到几小时内。

节省试剂:极大地节约了珍贵的实验样本、引物和酶。

结果可靠:所有反应条件(除温度外)完全一致,排除了批次误差,使优化结果更准确可信。

2. 三大应用场景详解
(1)PCR条件优化
这是梯度功能最直接的应用。主要用于:

退火温度优化:为新设计的引物快速确定最佳退火温度。

延伸温度/时间优化:对于长片段扩增或高GC含量模板,可能需要优化延伸条件。

变性温度优化:对于一些特殊酶或复杂模板,可能需要微调变性温度。

(2)快速PCR
这得益于仪器硬件的性能。

原理:通过提高温度转换速率,并适当缩短每个步骤的保持时间,来显著缩短整个PCR循环的时间。

应用场景:

临床快速诊断。

质控检测,需要快速出结果。

注意:快速PCR通常需要配合专用的快速PCR试剂盒,以确保酶在短时间内的反应效率。

(3)标准PCR
这是PCR仪的基本功能,用于常规的、条件成熟的实验。

应用场景:

基因克隆中的DNA扩增。

菌落PCR鉴定阳性克隆。

基因表达分析(RT-PCR的后续步骤)。

基因分型等。

对于这些实验,引物和反应条件都已优化好,无需使用梯度功能,直接运行标准程序即可。

hermo Fisher Veriti 96孔梯度PCR仪 是一台功能全面、性能可靠的实验室核心设备。

它既能通过梯度功能扮演 “研发者” 的角色,高效优化实验条件。

又能通过快速升温功能扮演 “加速者” 的角色,满足紧急检测需求。

同时它也是一台非常出色的 “执行者” ,稳定地完成大量的常规PCR实验。

它完美地结合了方法开发的高效性与日常操作的稳定性和高通量,是分子生物学实验室不可或缺的工具。
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