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Western Blot蛋白质印迹实验全流程

   日期:2025-11-06 07:40:15     来源:网络整理    作者:本站编辑    评论:0    
Western Blot蛋白质印迹实验全流程

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Western Blot蛋白质印迹实验全流程

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Western Blot蛋白质印迹实验全流程

Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。
主要流程:样品制备-配胶-凝胶电泳-转膜-封闭-孵一抗二抗-显影
注意事项:
✨三明治模型:一定要按顺序放,黑胶白膜(放反等于白做
)。
✨全程低温操作:蛋白提取、离心、转膜需保持4°C,防止蛋白降解。
✨现配先用试剂:裂解液,BCA工作液等。
✨抗体保存:避免反复冻融,一抗、二抗使用后需低温保存。
✨膜处理小心操作:PVDF膜不可用手直接接触白面,避免污染,裁剪下来的PVDF膜一定放入甲醇中,有助于固定蛋白质。
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