一、实验准备
1、材料?
细胞样本（如培养的细胞或组织切片）、ALP染色试剂盒、载玻片、盖玻片、显微镜等。
2、试剂配制?
按照试剂盒说明书配制底物缓冲液、显色液等试剂。
二、实验步骤
1、细胞固定?
将细胞样本用适当的固定液（如4%多聚甲醛）固定一定时间，通常为10-15分钟，然后用PBS冲洗3次，每次5分钟。
2、通透处理（可选）?
如果是细胞样本，对于一些需要增加试剂通透性的情况，可用0.1%Triton X-100处理细胞5-10分钟，之后再用PBS冲洗。
3、孵育底物?
将配制好的底物缓冲液和显色液混合均匀，滴加到细胞样本或组织切片上，在37℃恒温箱中孵育30-60分钟。
4、终止反应?
孵育结束后，用蒸馏水或PBS冲洗样本，以终止反应。
5、复染（可选）?
根据需要，可用苏木精等进行复染，以更好地观察细胞形态，复染时间一般为3-5分钟，然后水洗。
6、脱水、透明?
依次用梯度乙醇（如70%、80%、95%、100%）脱水，每次5-10分钟，再用二甲苯透明10-15分钟。
7、封片?
将中性树胶滴在载玻片上，盖上盖玻片，待树胶干燥后，在显微镜下观察并拍照记录。
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1、材料?
细胞样本（如培养的细胞或组织切片）、ALP染色试剂盒、载玻片、盖玻片、显微镜等。
2、试剂配制?
按照试剂盒说明书配制底物缓冲液、显色液等试剂。
二、实验步骤
1、细胞固定?
将细胞样本用适当的固定液（如4%多聚甲醛）固定一定时间，通常为10-15分钟，然后用PBS冲洗3次，每次5分钟。
2、通透处理（可选）?
如果是细胞样本，对于一些需要增加试剂通透性的情况，可用0.1%Triton X-100处理细胞5-10分钟，之后再用PBS冲洗。
3、孵育底物?
将配制好的底物缓冲液和显色液混合均匀，滴加到细胞样本或组织切片上，在37℃恒温箱中孵育30-60分钟。
4、终止反应?
孵育结束后，用蒸馏水或PBS冲洗样本，以终止反应。
5、复染（可选）?
根据需要，可用苏木精等进行复染，以更好地观察细胞形态，复染时间一般为3-5分钟，然后水洗。
6、脱水、透明?
依次用梯度乙醇（如70%、80%、95%、100%）脱水，每次5-10分钟，再用二甲苯透明10-15分钟。
7、封片?
将中性树胶滴在载玻片上，盖上盖玻片，待树胶干燥后，在显微镜下观察并拍照记录。
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