

准备工作❗:1.5 ml EP管,PCR管,毛细管,碘伏,棉花棒,50ml EP管,眼科剪。
Step:将小鼠装进小鼠固定器里面或者50mlEP管中(自制),露出尾部。
Step:眼科剪取部分小鼠尾巴,放入1.5ml EP管中。剪碎
Step:加入0.001浓度的NaOH,95度水浴锅1-1.5h,12g 离心20min
Step:准备PCR体系。我们用的是诺唯赞试剂盒(货号: PD101)按照说明书体系(图1)加样(一般有AB两种引物,所以上样也是两排管子,标记清楚很重要‼️)
Step: PCR程序也按照说明书(根据自身情况可调整Tm值)
Step: 配2%琼脂糖凝胶(1.2g琼脂粉+60ml 1×TAE,微波炉加热2 min,再加热30s, 至完全溶解,稍微冷却后,加入6uL核酸染料,轻柔混匀,不要产生气泡,倒胶,至少等30 min后跑胶,时间不宜过长)。
Step:样本上样量10uL/管,marker 5000或2000,上样量5uL。恒压电泳(150 V),样本和maker尽量跑到底停止。最后就是显影(图2)?? 阳性率还不错✅#博士生活记录 #生物实验 #科研 #科研日常 #动物实验 #小鼠基因型鉴定 #鼠尾鉴定 #小鼠基因检测
Step:将小鼠装进小鼠固定器里面或者50mlEP管中(自制),露出尾部。
Step:眼科剪取部分小鼠尾巴,放入1.5ml EP管中。剪碎
Step:加入0.001浓度的NaOH,95度水浴锅1-1.5h,12g 离心20min
Step:准备PCR体系。我们用的是诺唯赞试剂盒(货号: PD101)按照说明书体系(图1)加样(一般有AB两种引物,所以上样也是两排管子,标记清楚很重要‼️)
Step: PCR程序也按照说明书(根据自身情况可调整Tm值)
Step: 配2%琼脂糖凝胶(1.2g琼脂粉+60ml 1×TAE,微波炉加热2 min,再加热30s, 至完全溶解,稍微冷却后,加入6uL核酸染料,轻柔混匀,不要产生气泡,倒胶,至少等30 min后跑胶,时间不宜过长)。
Step:样本上样量10uL/管,marker 5000或2000,上样量5uL。恒压电泳(150 V),样本和maker尽量跑到底停止。最后就是显影(图2)?? 阳性率还不错✅#博士生活记录 #生物实验 #科研 #科研日常 #动物实验 #小鼠基因型鉴定 #鼠尾鉴定 #小鼠基因检测


