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FITC-SPA免疫荧光染色方法

   日期:2025-11-03 09:59:43     来源:网络整理    作者:本站编辑    评论:0    
FITC-SPA免疫荧光染色方法

FITC-SPA免疫荧光染色方法

【标题】FITC标记金黄色葡萄球菌,FITC-Staphylococcus aureus,FITC-SPA
&凯新试剂介绍
FITC标记的金黄色葡萄球菌和FITC标记的金黄色葡萄球菌蛋白A是两种常用于微生物学、免疫学和生物医学研究的荧光标记探针。
结构组成
FITC标记的金黄色葡萄球菌:
由完整的金黄色葡萄球菌菌体与异硫氰酸荧光素(FITC)通过共价结合形成。FITC的异硫氰酸酯基团(-N=C=S)与细菌表面蛋白的氨基(-NH2)反应,形成稳定的硫脲键,使菌体携带绿色荧光特性。
FITC标记的蛋白A(FITC-SPA):
蛋白A(SPA)是金黄色葡萄球菌细胞壁的一种特征性蛋白,分子量约42 kDa,由四个高度保守的IgG结合结构域组成(每个结构域约58个氨基酸)。
FITC通过相同机制与SPA的赖氨酸残基结合,形成SPA-FITC复合物。
&凯新试剂参数
试剂名称:mPEG2000-AZO-PEI1800,甲氧基聚乙二醇-偶氮苯-聚乙烯亚胺,甲氧基-聚乙二醇2000-偶氮苯-聚乙烯亚胺1800
外观:固态粉末或颗粒
分子量:0.4k,0.6k,1k,2k,3.4k,5k,10k等(支持定制)
溶解性:溶于部分有机溶剂以及水
纯度:95%+
规格:1mg、5mg、10mg
储存条件:-20℃的干燥环境中,避光保存,避免频繁解冻和冷冻,现配现用。
&FITC-SPA免疫荧光染色方法
FITC-SPA常用于间接免疫荧光检测,通过其与抗体Fc段结合的特性标记目标抗原。
样本准备
固定:用4%多聚甲醛或丙酮固定样本(细胞涂片、组织切片等)。
透化:如需检测细胞内抗原,可用0.1% Triton X-100处理10分钟(可选)。
封闭
用10%正常血清(如羊血清)或BSA室温封闭30分钟,减少非特异性结合。
一抗孵育
滴加特异性一抗(如兔抗目标抗原抗体),4℃过夜或37℃孵育1小时。
清洗
用PBS冲洗3次,每次5分钟。
FITC-SPA孵育
滴加FITC标记的SPA(常用稀释比例1:50-1:100),37℃避光孵育45分钟。
最终清洗与封片
PBS冲洗后,用抗荧光淬灭封片剂(如甘油-PBS混合液)封片,荧光显微镜观察。
注意:本试剂用于科研领域,其他用途概不适用!
编辑:以上内容由凯新生物小言整理!
#科研试剂 #化学试剂
 
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