鬼笔环肽可以特异性结合丝状肌动蛋白（F-actin），常用来对细胞中F-actin进行染色。
一、实验准备
1、材料准备?
细胞爬片（培养有需要染色细胞的玻片）、PBS缓冲液、4%多聚甲醛固定液、0.1%Triton X-100通透液、鬼笔环肽工作液（用PBS按照一定比例稀释，如1:200，具体依说明书）、DAPI染液（用于染细胞核）、抗荧光淬灭封片剂、载玻片、盖玻片。
2、仪器准备?
移液器及枪头、湿盒、荧光显微镜。
二、实验步骤
1、细胞固定?
取出细胞爬片，用PBS轻轻冲洗3次，每次3-5分钟，以去除细胞表面的培养基及杂质。将爬片放入4%多聚甲醛固定液中，室温固定15-20分钟，使细胞形态及内部结构固定。固定完成后，再用PBS冲洗3次，每次3-5分钟，洗去多余的多聚甲醛。
2、细胞通透?
将细胞爬片放入0.1%Triton X-100通透液中，室温孵育10-15分钟，增加细胞膜通透性，便于后续鬼笔环肽进入细胞与F-actin结合。通透结束后，用PBS冲洗3次，每次3-5分钟，洗去通透液。
3、鬼笔环肽染色?
将爬片置于湿盒中，滴加适量鬼笔环肽工作液，确保爬片完全被覆盖，室温避光孵育30-60分钟，使鬼笔环肽与F-actin充分结合。孵育结束后，用PBS在暗处冲洗3次，每次5-10分钟，洗去未结合的鬼笔环肽。
4、细胞核染色?
滴加适量DAPI染液，覆盖爬片，室温避光孵育5-10分钟，对细胞核进行染色。之后，用PBS在暗处冲洗3次，每次3-5分钟，洗去多余DAPI染液。
5、封片?
将爬片从PBS中取出，用滤纸吸去9多余液体，但注意不要吸干。在载玻片上滴加一滴抗荧光淬灭封片剂，将爬片细胞面朝下盖在封片剂上，轻轻按压，使爬片与封片剂充分接触，避免产生气泡，然后晾干。
6、观察与拍照?
将封好的玻片置于荧光显微镜下，选择合适的荧光通道观察并拍照。鬼笔环肽通常偶联有荧光基团（如FITC、TRITC等），在相应荧光通道下，F-actin呈现出绿色或红色荧光；DAPI在紫外光激发下，细胞核呈现蓝色荧光。
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一、实验准备
1、材料准备?
细胞爬片（培养有需要染色细胞的玻片）、PBS缓冲液、4%多聚甲醛固定液、0.1%Triton X-100通透液、鬼笔环肽工作液（用PBS按照一定比例稀释，如1:200，具体依说明书）、DAPI染液（用于染细胞核）、抗荧光淬灭封片剂、载玻片、盖玻片。
2、仪器准备?
移液器及枪头、湿盒、荧光显微镜。
二、实验步骤
1、细胞固定?
取出细胞爬片，用PBS轻轻冲洗3次，每次3-5分钟，以去除细胞表面的培养基及杂质。将爬片放入4%多聚甲醛固定液中，室温固定15-20分钟，使细胞形态及内部结构固定。固定完成后，再用PBS冲洗3次，每次3-5分钟，洗去多余的多聚甲醛。
2、细胞通透?
将细胞爬片放入0.1%Triton X-100通透液中，室温孵育10-15分钟，增加细胞膜通透性，便于后续鬼笔环肽进入细胞与F-actin结合。通透结束后，用PBS冲洗3次，每次3-5分钟，洗去通透液。
3、鬼笔环肽染色?
将爬片置于湿盒中，滴加适量鬼笔环肽工作液，确保爬片完全被覆盖，室温避光孵育30-60分钟，使鬼笔环肽与F-actin充分结合。孵育结束后，用PBS在暗处冲洗3次，每次5-10分钟，洗去未结合的鬼笔环肽。
4、细胞核染色?
滴加适量DAPI染液，覆盖爬片，室温避光孵育5-10分钟，对细胞核进行染色。之后，用PBS在暗处冲洗3次，每次3-5分钟，洗去多余DAPI染液。
5、封片?
将爬片从PBS中取出，用滤纸吸去9多余液体，但注意不要吸干。在载玻片上滴加一滴抗荧光淬灭封片剂，将爬片细胞面朝下盖在封片剂上，轻轻按压，使爬片与封片剂充分接触，避免产生气泡，然后晾干。
6、观察与拍照?
将封好的玻片置于荧光显微镜下，选择合适的荧光通道观察并拍照。鬼笔环肽通常偶联有荧光基团（如FITC、TRITC等），在相应荧光通道下，F-actin呈现出绿色或红色荧光；DAPI在紫外光激发下，细胞核呈现蓝色荧光。
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