
平台新配了一台Waters的液相系统,外置了一个注射器一样的东西,说是留作进样用的。大家围绕这个东西讨论了挺久,好奇进样是通过什么机制实现的。我突然想到一个问题,做过GC和LC的你,不知道有没有好奇过这个问题:为什么GC可以用一个带刻度的进样针直接进样,而LC却要通过六通阀结构,先加载到进样环,然后再注入色谱柱中,为什么不可以直接进样?
原因就在于,在液相系统中,泵的输出压力往往是几百bar,如果进样器要直接把样品打入色谱柱,就相当于要顶着高压推进液体,这对自动进样器的机械系统来说是完全不现实的。因此进样阀必须采用一种,“低压装样/高压进样”的方式,也就是说,先在load低压模式下,将样品吸入进样环中,再切换到inject状态,让高压流动相把样品带入色谱柱。
这里的进样环,就相当于一个精准容积的中转仓,在load状态时,样品以大气压力装入环内,体积由环决定,非常稳定,这样就保证了进样体积高度可控、色谱峰重现性好。一般液相配套的进样环都远远大于我们的进样体积,它具体是如何进样的呢?
进样环的进样方式分两种,一种叫full-loop injection,一种叫partial-loop injection。如果进样环是10uL,但我们只需要进样1uL,这就叫partial-loop injection。进样时,进样针从样品瓶吸取精确体积(靠高精度注射器驱动),然后在针的后面吸取一段空气,叫做air gap,通常只有零点几uL,这是做为了防止样品与注射器中液体混合,稳定样品体积。吸取完成后,注射器继续推动针内1uL样品进入到进样环的一端,这时候样品会与样品环内原本充满的流动相接触,但由于从load到inject的切换是ms级别的,因此这种接触本身很难对样本溶液有稀释或其他影响,就是说,在样品还没有反应过来的时候,已经被流动相从进样环中推到了色谱柱上,这样就完成了1uL样品的准确完整进入色谱柱。
#质谱技术#液相色谱#六通阀
原因就在于,在液相系统中,泵的输出压力往往是几百bar,如果进样器要直接把样品打入色谱柱,就相当于要顶着高压推进液体,这对自动进样器的机械系统来说是完全不现实的。因此进样阀必须采用一种,“低压装样/高压进样”的方式,也就是说,先在load低压模式下,将样品吸入进样环中,再切换到inject状态,让高压流动相把样品带入色谱柱。
这里的进样环,就相当于一个精准容积的中转仓,在load状态时,样品以大气压力装入环内,体积由环决定,非常稳定,这样就保证了进样体积高度可控、色谱峰重现性好。一般液相配套的进样环都远远大于我们的进样体积,它具体是如何进样的呢?
进样环的进样方式分两种,一种叫full-loop injection,一种叫partial-loop injection。如果进样环是10uL,但我们只需要进样1uL,这就叫partial-loop injection。进样时,进样针从样品瓶吸取精确体积(靠高精度注射器驱动),然后在针的后面吸取一段空气,叫做air gap,通常只有零点几uL,这是做为了防止样品与注射器中液体混合,稳定样品体积。吸取完成后,注射器继续推动针内1uL样品进入到进样环的一端,这时候样品会与样品环内原本充满的流动相接触,但由于从load到inject的切换是ms级别的,因此这种接触本身很难对样本溶液有稀释或其他影响,就是说,在样品还没有反应过来的时候,已经被流动相从进样环中推到了色谱柱上,这样就完成了1uL样品的准确完整进入色谱柱。
#质谱技术#液相色谱#六通阀


