?本期内容导航：实验原理 -实验材料 - 实验步骤- 注意事项
?实验原理： Transwell实验模拟体内细胞的跨膜运动 精准评估细胞的迁移或侵袭能力?
?实验步骤详解：
1️⃣ 细胞培养与接种 ▫️取对数期细胞铺于6孔板 ▫️基因敲低：铺板密度30%-40% ▫️基因过表达：铺板密度60%-70%
2️⃣ 细胞处理 ▫️贴壁培养24 h后 ▫️按实验设计进行处理 ▫️可选择siRNA转染或质粒转染
3️⃣ 细胞收集与制备 ▫️消化细胞并离心收集 ▫️无血清培养基重悬 ▫️推荐接种量：5×10^4个/小室
?新手建议设置不同浓度对比优化
4️⃣ 细胞接种与培养 ▫️上室加入100 µL细胞悬液 ▫️下室加入700 µL含20%FBS培养基 ▫️37℃、5%CO2培养箱孵育24-48h
?可根据实验需求加入药物刺激
5️⃣ 固定与染色 ▫️PBS清洗小室 ▫️4%多聚甲醛+0.1%结晶紫固定染色15 min
▫️PBS清洗2次，棉签擦除未迁移细胞 ?观察上室是否干净，确保清除彻底
6️⃣ 观察与采集 ▫️倒置显微镜拍照 ▫️10X和20X物镜多视野拍摄 ▫️保存图片用于Image J分析
7️⃣ 小室清洗（重复利用） ▫️胰酶消化5 min去除残留细胞 ▫️75%酒精浸泡消毒、
✨掌握这些步骤，Transwell实验轻松拿下！ 记得收藏备用，实验路上少走弯路?
#Transwell实验 #细胞迁移 #科研教程 #实验室必备 #实验技巧#科研 #诺贝尔奖 #生物医药
?实验原理： Transwell实验模拟体内细胞的跨膜运动 精准评估细胞的迁移或侵袭能力?
?实验步骤详解：
1️⃣ 细胞培养与接种 ▫️取对数期细胞铺于6孔板 ▫️基因敲低：铺板密度30%-40% ▫️基因过表达：铺板密度60%-70%
2️⃣ 细胞处理 ▫️贴壁培养24 h后 ▫️按实验设计进行处理 ▫️可选择siRNA转染或质粒转染
3️⃣ 细胞收集与制备 ▫️消化细胞并离心收集 ▫️无血清培养基重悬 ▫️推荐接种量：5×10^4个/小室
?新手建议设置不同浓度对比优化
4️⃣ 细胞接种与培养 ▫️上室加入100 µL细胞悬液 ▫️下室加入700 µL含20%FBS培养基 ▫️37℃、5%CO2培养箱孵育24-48h
?可根据实验需求加入药物刺激
5️⃣ 固定与染色 ▫️PBS清洗小室 ▫️4%多聚甲醛+0.1%结晶紫固定染色15 min
▫️PBS清洗2次，棉签擦除未迁移细胞 ?观察上室是否干净，确保清除彻底
6️⃣ 观察与采集 ▫️倒置显微镜拍照 ▫️10X和20X物镜多视野拍摄 ▫️保存图片用于Image J分析
7️⃣ 小室清洗（重复利用） ▫️胰酶消化5 min去除残留细胞 ▫️75%酒精浸泡消毒、
✨掌握这些步骤，Transwell实验轻松拿下！ 记得收藏备用，实验路上少走弯路?
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