化工塑胶
木南笔记?|Transwell细胞迁移实验
2025-11-03 10:29
木南笔记?|Transwell细胞迁移实验

木南笔记?|Transwell细胞迁移实验

木南笔记?|Transwell细胞迁移实验

木南笔记?|Transwell细胞迁移实验

木南笔记?|Transwell细胞迁移实验

木南笔记?|Transwell细胞迁移实验

? 一、 它到底是什么?【核心原理】
想象一下:
➡️ 上室:住着一群可怜巴巴的“细胞宝宝”,吃的很差(无血清)。
➡️ 下层:是个“美食天堂”,充满了美味血清(高浓度趋化因子)。
➡️ 中间:隔着一层带孔的“防盗网”(聚碳酸酯膜)。
✅ 实验精髓:
饥饿的细胞宝宝们,闻到楼下的饭香,就会努力从“防盗网”的孔里钻过去!?️
最后,数一数钻过去的细胞有多少,就能判断它们的“迁移能力”啦! ?
⚠️ 重点区分!迁移?侵袭:
• 迁移实验:膜是裸奔的,测的是细胞的“运动力”。?‍♀️
• 侵袭实验:膜上铺了基质胶,模拟真实生理屏障,测的是“钻墙破壁”的能力。? 更高级!
? 二、 手把手实验步骤【保姆级教程】
记住这个流程,轻松搞定!?
1️⃣ “饿肚子”处理 ?️
用无血清培养基培养细胞一段时间,让它们“饥肠辘辘”。
2️⃣ 布置“美食广场” ?
在24孔板的下层加入含血清的培养基(实验组)或无血清培养基(对照组)。
3️⃣ “投放细胞宝宝” ?
将用无血清培养基重悬的细胞,小心加到Transwell上室里。
关键! 加的时候不能有气泡!❌
4️⃣ “静待花开” ⏰
把整个板子放进37°C培养箱,孵育12-48小时(时间需要自己优化哦!)。
5️⃣ “固定与染色” ?
孵育结束后,用湿棉签把膜上表面没迁移的细胞擦掉!(这步超关键!)
然后用4%多聚甲醛固定,再用0.1%结晶紫染色。
6️⃣ “数数看结果” ?
把膜晾干,倒扣在载玻片上,在显微镜下随机选5个视野,数膜下表面的紫色细胞!
? 三、 必看注意事项&小贴士
✨ 细胞密度是关键:太密会堆在一起,太疏数不出来,一定要做预实验!
✨ 孵育时间要拿准:时间太短细胞没过去,太长细胞会掉下来。
✨ 擦除上室细胞要温柔又彻底:这是实验成败的命门!
✨ 别忘了设对照:下室用无血清培养基,证明迁移是“饭香”引起来的。
? 总结一下:
Transwell迁移实验,就是一个利用 “浓度差” 驱动细胞 “穿网而过” ,并通过 计数 来量化细胞运动能力的经典方法。
科研路上不孤单,一起加油!? 还有什么想了解的实验,评论区告诉我呀!?
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