1.实验准备：
选取6-8周龄SPF级雄性小鼠，适应性喂养1周；准备实验所需的病毒液（如柯萨奇病毒B3）、无菌PBS、注射器、手术器械、麻醉剂及相关检测试剂，提前对实验环境和器械进行灭菌处理。
2.病毒稀释与剂量确定：
将冻存的病毒液用无菌PBS稀释至所需浓度，根据预实验结果确定每只小鼠的感染剂量（通常为100-1000TCID50），确保剂量均一且符合造模需求。
3.小鼠感染操作：
对小鼠进行轻度麻醉（如异氟烷吸入麻醉），待小鼠意识模糊、活动减弱后，采用腹腔注射方式将稀释好的病毒液注入小鼠体内；对照组小鼠注射等量无菌PBS，操作过程中避免损伤小鼠内脏。
4.造模后饲养观察：
将感染后的小鼠放回SPF级饲养环境，保持温度22-25℃、湿度40%-60%，自由摄食饮水；每日观察小鼠的精神状态、活动量、饮食饮水量及体重变化，记录是否出现脱毛、腹泻、弓背等异常症状，持续观察7-14天（根据模型需求调整观察周期）。
5.样本采集与处理：
在造模周期结束后，对小鼠实施安乐死（如颈椎脱臼法），迅速解剖分离心脏组织；一部分心脏组织放入4%多聚甲醛溶液中固定，用于后续病理切片制作与HE染色观察；另一部分心脏组织放入液氮中速冻，后转移至-80℃冰箱保存，用于病毒载量检测、炎症因子检测等分子生物学实验。
6.模型验证：
对固定好的心脏组织进行石蜡包埋、切片、HE染色，在显微镜下观察心肌组织是否出现炎性细胞浸润、心肌细胞坏死、间质水肿等典型心肌炎病理改变；同时通过RT-PCR检测心脏组织中病毒RNA的表达量，或通过ELISA检测血清中炎症因子（如TNF-α、IL-6）的水平，综合判断模型构建是否成功。
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选取6-8周龄SPF级雄性小鼠，适应性喂养1周；准备实验所需的病毒液（如柯萨奇病毒B3）、无菌PBS、注射器、手术器械、麻醉剂及相关检测试剂，提前对实验环境和器械进行灭菌处理。
2.病毒稀释与剂量确定：
将冻存的病毒液用无菌PBS稀释至所需浓度，根据预实验结果确定每只小鼠的感染剂量（通常为100-1000TCID50），确保剂量均一且符合造模需求。
3.小鼠感染操作：
对小鼠进行轻度麻醉（如异氟烷吸入麻醉），待小鼠意识模糊、活动减弱后，采用腹腔注射方式将稀释好的病毒液注入小鼠体内；对照组小鼠注射等量无菌PBS，操作过程中避免损伤小鼠内脏。
4.造模后饲养观察：
将感染后的小鼠放回SPF级饲养环境，保持温度22-25℃、湿度40%-60%，自由摄食饮水；每日观察小鼠的精神状态、活动量、饮食饮水量及体重变化，记录是否出现脱毛、腹泻、弓背等异常症状，持续观察7-14天（根据模型需求调整观察周期）。
5.样本采集与处理：
在造模周期结束后，对小鼠实施安乐死（如颈椎脱臼法），迅速解剖分离心脏组织；一部分心脏组织放入4%多聚甲醛溶液中固定，用于后续病理切片制作与HE染色观察；另一部分心脏组织放入液氮中速冻，后转移至-80℃冰箱保存，用于病毒载量检测、炎症因子检测等分子生物学实验。
6.模型验证：
对固定好的心脏组织进行石蜡包埋、切片、HE染色，在显微镜下观察心肌组织是否出现炎性细胞浸润、心肌细胞坏死、间质水肿等典型心肌炎病理改变；同时通过RT-PCR检测心脏组织中病毒RNA的表达量，或通过ELISA检测血清中炎症因子（如TNF-α、IL-6）的水平，综合判断模型构建是否成功。
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