一、实验准备
1. 实验动物
品系：ACI（August-Copenhagen Irish）大鼠（雌性，6-8周龄，体重150-200g）。
饲养条件：SPF级环境，恒温（22±2℃）、湿度（50±10%）、12h光照/黑暗循环，自由饮食饮水。
适应性饲养：购入后适应性喂养1周。
2. 主要试剂与材料
雌激素：17β-雌二醇（E2，Sigma），溶于玉米油或芝麻油（浓度根据实验设计调整，常用0.5-5 mg/kg）。
溶剂对照：玉米油/芝麻油（灭菌）。
其他：无菌注射器、胰岛素针头、解剖器械、多聚甲醛（固定组织）、液氮（速冻样本）等。
二、实验步骤
1. 雌激素处理
给药方案：
途径：皮下注射或腹腔注射。
剂量：根据预实验调整（推荐初始剂量1-2 mg E2/kg体重，每周3次）。
周期：持续给药8-12周（定期观察肿瘤发生情况）。
对照组：同等体积溶剂（玉米油）注射。
2. 观察与监测
体重监测：每周称重1-2次，评估雌激素毒性。
乳腺检查：
触诊：每周2次，记录乳腺结节出现时间、数量、大小（游标卡尺测量）。
影像学：可选超声或MRI动态监测肿瘤进展。
3. 终点处理
终止标准：
肿瘤直径≥1.5cm 或 出现溃疡/坏死。
大鼠体重下降＞20% 或 出现严重不良反应。
样本采集：
肿瘤组织：手术剥离，部分液氮速冻（-80℃保存），部分4%多聚甲醛固定（石蜡切片）。
血液：心脏采血，离心分离血清（-80℃保存，用于激素水平检测）。
其他器官：肝、脾、子宫等取材，评估雌激素副作用。
4. 病理学分析
HE染色：确认肿瘤组织学类型（腺癌、导管癌等）。
免疫组化：检测ERα、PR、HER2等标志物表达。
分子生物学：qPCR/WB检测雌激素通路相关基因（如ESR1、PGR、Cyclin D1）。
三、注意事项
1. 剂量优化：需预实验确定E2最佳剂量（过高导致毒性，过低难以诱导肿瘤）。
2. 动物福利：
避免肿瘤过大引起疼痛（及时终止实验）。
单笼饲养防止大鼠互相啃咬肿瘤。
3. 环境控制：避免环境雌激素干扰（使用无酚红垫料、玻璃水瓶）。
4. 对照设置：必须包含溶剂对照组和空白对照组。
四、模型验证
成功率：ACI大鼠对雌激素敏感，通常8-12周内乳腺癌发生率可达70%-90%。
特征：多为雌激素受体阳性（ER+）腺癌，类似人类luminal型乳腺癌。
参考文献示例
1. Li et al. (2010). Cancer Res - ACI大鼠模型在乳腺癌研究中的应用
2. Shull et al. (1997). Endocrinology - 雌激素诱导大鼠乳腺肿瘤的机制
#医学实验 #科研 #实验
1. 实验动物
品系：ACI（August-Copenhagen Irish）大鼠（雌性，6-8周龄，体重150-200g）。
饲养条件：SPF级环境，恒温（22±2℃）、湿度（50±10%）、12h光照/黑暗循环，自由饮食饮水。
适应性饲养：购入后适应性喂养1周。
2. 主要试剂与材料
雌激素：17β-雌二醇（E2，Sigma），溶于玉米油或芝麻油（浓度根据实验设计调整，常用0.5-5 mg/kg）。
溶剂对照：玉米油/芝麻油（灭菌）。
其他：无菌注射器、胰岛素针头、解剖器械、多聚甲醛（固定组织）、液氮（速冻样本）等。
二、实验步骤
1. 雌激素处理
给药方案：
途径：皮下注射或腹腔注射。
剂量：根据预实验调整（推荐初始剂量1-2 mg E2/kg体重，每周3次）。
周期：持续给药8-12周（定期观察肿瘤发生情况）。
对照组：同等体积溶剂（玉米油）注射。
2. 观察与监测
体重监测：每周称重1-2次，评估雌激素毒性。
乳腺检查：
触诊：每周2次，记录乳腺结节出现时间、数量、大小（游标卡尺测量）。
影像学：可选超声或MRI动态监测肿瘤进展。
3. 终点处理
终止标准：
肿瘤直径≥1.5cm 或 出现溃疡/坏死。
大鼠体重下降＞20% 或 出现严重不良反应。
样本采集：
肿瘤组织：手术剥离，部分液氮速冻（-80℃保存），部分4%多聚甲醛固定（石蜡切片）。
血液：心脏采血，离心分离血清（-80℃保存，用于激素水平检测）。
其他器官：肝、脾、子宫等取材，评估雌激素副作用。
4. 病理学分析
HE染色：确认肿瘤组织学类型（腺癌、导管癌等）。
免疫组化：检测ERα、PR、HER2等标志物表达。
分子生物学：qPCR/WB检测雌激素通路相关基因（如ESR1、PGR、Cyclin D1）。
三、注意事项
1. 剂量优化：需预实验确定E2最佳剂量（过高导致毒性，过低难以诱导肿瘤）。
2. 动物福利：
避免肿瘤过大引起疼痛（及时终止实验）。
单笼饲养防止大鼠互相啃咬肿瘤。
3. 环境控制：避免环境雌激素干扰（使用无酚红垫料、玻璃水瓶）。
4. 对照设置：必须包含溶剂对照组和空白对照组。
四、模型验证
成功率：ACI大鼠对雌激素敏感，通常8-12周内乳腺癌发生率可达70%-90%。
特征：多为雌激素受体阳性（ER+）腺癌，类似人类luminal型乳腺癌。
参考文献示例
1. Li et al. (2010). Cancer Res - ACI大鼠模型在乳腺癌研究中的应用
2. Shull et al. (1997). Endocrinology - 雌激素诱导大鼠乳腺肿瘤的机制
#医学实验 #科研 #实验